服務內容
哺乳動物細胞蛋白表達服務
德泰生物提供哺乳動物細胞蛋白表達服務。我們擁有達到cGMP標準的百級潔凈細胞房，及自主研發的哺乳動物系統高表達載體-proEMTM載體，結合定向馴化的CHO或HEK293細胞，采用無血清懸浮或粘附培養，細胞培養密度可達2-4×106cells/ml，蛋白表達產量可達毫克至克級別。德泰哺乳動物細胞表達服務可以提供：瞬時轉染表達，重組抗體表達，穩定細胞系構建。我們具有以下優勢：
服務優勢:
- 活性更高：哺乳動物系統，實現復雜糖基化修飾，蛋白活性更高；
- 瞬時轉染：細胞瞬時轉染表達，蛋白/抗體的快速小量制備；
- 穩定轉染：cell pool/單克隆細胞株，幾十種細胞轉染經驗；
- 重組抗體：全長抗體表達，不成功不收費，IgG/IgM/IgE/IgD，scFv，Fab，VHH；
- 自主研發：自主研發高表達載體，自建細胞房，實驗成功率>95%；
細胞瞬時轉染
德泰提供哺乳動物細胞瞬時轉染服務，瞬時轉染可在短期內獲得一定量的可溶性蛋白，可用于基因產物的快速表達和蛋白的小規模制備。我們通過基因序列優化，自主研發的高表達載體，結合豐富的細胞轉染經驗，蛋白表達產量可達毫克至克級別，細胞培養密度可達2-4×106cells/ml…
穩定細胞株篩選
德泰提供哺乳動物細胞-穩定細胞系構建服務，穩定篩選的細胞株可以應用于多種研究領域，或用于目的蛋白/抗體的工業級生產，德泰擁有十幾年細胞培養的經驗，我們成功轉染過幾十種細胞系，通過抗生素篩選或利用基因缺陷原理進行篩選。CHO-K1，M14，HeLa，HepG2，THP-1，MCF-7，Vero…
重組抗體表達
德泰提供種類齊全的重組抗體表達服務，我們可以表達各類全長抗體或抗體片段，包括重組IgG/IgM/IgE/IgD，scFv單鏈抗體，di-scFv，Fab，F（ab’），sdAb/VHH，Fc融合蛋白，人鼠嵌合抗體等。您只需提供抗體基因序列（全長或可變區序列），我們可以交付毫克至克級別的重組抗體…
瞬時轉染 VS 穩定細胞系構建：
| 比較項目 | 瞬時轉染 | 穩定轉染 （穩定細胞系構建） |
|---|---|---|
| 原理 |  |
 |
| 蛋白產量/L | 毫克級/L | 可穩定高產（克級） |
| 細胞培養密度/L | 2-4×106cells/ml | 2-4×107cells/ml |
| 實驗周期 | 4-6周 | 3-6月 |
| 成本 | 低 | 高 |
| 培養細胞 | CHO/HEK293 | CHO |
| 轉染方法 | 脂質體/陽離子聚合物/電轉/磷酸鈣法轉染 | |
服務流程
- 密碼子優化：根據密碼子簡并性，優化mRNA結構，提高哺乳動物系統蛋白表達量
- proEM載體：德泰通過表達元件的改造，獲得雙壓力篩選的高表達proEM系列載體
- 強調控元件：創新型Kozak序列，及優化的信號肽序列，使融合蛋白在哺乳動物細胞中的表達效率更高
- 蛋白純化：德泰擁有完備的蛋白純化平臺，可以提供多種蛋白純化方法。針對特定標簽及無標簽蛋白，我們保證交付至少>90%純度以上的蛋白
蛋白表達系統選擇
| 表達系統 | 哺乳動物表達系統 | 原核表達系統 | 酵母表達系統 | 昆蟲表達系統 |
|---|---|---|---|---|
| 培養基成分 | 復雜 | 簡單 | 簡單 | 復雜 |
| 成本 | 高 | 低 | 中等 | 中等 |
| 蛋白折疊 | 正確折疊 | 可能需要重折疊 | 可能需要重折疊 | 正確折疊 |
| 翻譯后修飾 | 修飾力強 | 無 | 有修飾能力 | 有修飾能力 |
| N-糖基化 | 復雜修飾 | 無 | 簡單修飾 | 簡單修飾 |
| O-糖基化 | 是 | 無 | 是 | 是 |
| 磷酸化 | 是 | 無 | 是 | 是 |
| 乙酰化 | 是 | 無 | 是 | 是 |
| Γ-羧化 | 是 | 無 | 無 | 無 |
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